LF 500 NanoScan

Multifunktionsreader für Multiwellplatten

Überblick || Aufbau und Funktionsweise || Technische Angaben || Applikationen || Automatisierung

Aufbau und Funktionsweise

Die Fluoreszenzreader der Familie NanoScan sind multifunktionale Mikrotiterplatten-Reader für ein breites Spektrum anspruchsvoller Aufgaben in der Forschung und im High-Throughput-Screening. Neben den bekannten Messverfahren "Fluoreszenz-Intensität", "zeitaufgelöste Fluoreszenz" und "Lumineszenz" sind insbesondere die neuen Methoden "schnelle zeitaufgelöste Fluoreszenz" und "Fluoreszenz-Lebensdauer" eine Möglichkeit, robuste homogene Assays zu entwickeln und im HTS einzusetzen.

Laser-induzierte Fluoreszenz

Die Realisierung eines innovativen Laserkonzepts resultierte in einer robusten, langlebigen und flexiblen Lichtquelle, die optimal für zeitaufgelöste Fluoreszenzmessungen geeignet ist, aber die Beschränkung anderer Lasersysteme auf einzelne Wellenlängen überwindet. Durch den einfachen manuellen Austausch eines Lasermoduls kann innerhalb von wenigen Sekunden eine nahezu beliebige Anregungswellenlänge zwischen 337 nm und 785 nm eingestellt werden. Der "Filter Selection Guide" gibt einen Überblick über optimale Filterkombinationen für bekannte Fluoreszenzlabel.

Empfindliche Detektion der Fluoreszenz

Optimierte Emissionsfilter ermöglichen die hochempfindliche Messung der Probenfluoreszenz in allen Plattenformaten im "Top-Reading" Modus. Es werden Lasermodule und Emissionsfilter für die Detektion nahezu aller Fluoreszenzmarker angeboten. Eine spezielle Anregungsoptik fokussiert das Anregungslicht in die Wells der Mikrotiterplatten, wodurch Crosstalk-Probleme nahezu ausgeschlossen werden können.

Die optional mögliche Ausstattung des Readers mit einem zweiten Messkanal gewährleistet die effiziente und Proben-schonende Messung von FRET-Assays oder anderen Assays mit zweifacher Markierung der Analyten bei zwei verschiedenen Emissionswellenlängen und derselben Anregungswellenlänge.

Fluoreszenz-Lebensdauer-Messung

Bildet der kurz-gepulste Laser die Grundlage für die Messung von Fluoreszenzlebensdauern - das Herzstück hierfür ist ein hoch-entwickeltes elektronisches Konzept. Es gewährleistet die Messung der Lebensdauern über einen Bereich von 1 bis 20.000 ns ohne Nachteile in Empfindlichkeit oder Messzeit und geht damit über die Beschränkungen anderer Messverfahren (z.B. zeitkorrelierte Einzelphotonenzählung) hinaus.

Für Lanthaniden-basierte Lumineszenz-Assays bietet der optional integrierte TRF-Modus sowohl die Messung der getorten Lumineszenzintensität (TRF) als auch die Messung der Lumineszenz-Lebensdauer bis in den Bereich von 1 ms an.

Nano-TRF (schnelle getorte Fluoreszenz)

Neben der Bestimmung der Fluoreszenzlebensdauern gestattet das Messverfahren ebenfalls eine "getorte" Fluoreszenzmessung. Analog zum bekannten TRF-Messverfahren, bei dem ab einem definierten Zeitpunkt nach dem Anregungslichtimpuls (typisch: 50 µs) für eine bestimmte Zeitdauer (typisch: 100 ... 500 µs) gemessen wird, kann per Mausklick ein beliebiger Messzeitbereich zwischen 0 und 20.000 ns mit beliebiger Verzögerung gegenüber dem Laserimpuls eingestellt werden. Vorteilhaft eingesetzt wird das Fast-TRF-Verfahren bei der Unterdrückung von Background- (Compound-) Fluoreszenzen in homogenen Assay-Formaten im High-Throughput-Screening.

Windows^TM-basierte Software

Alle Gerätefunktionen der NanoScan-Reader werden über die benutzerfreundliche Windows^TM-Software Mikrowin 2000 der Firma Mikrotek GmbH gesteuert. Eine einfache Auswahl der Plattenformate verschiedener Hersteller erfolgt aus einer Datenbank. Zusätzlich bietet die Software die Möglichkeit, mehrere Positionen in einem Well auszulesen und so über inhomogene Probenverteilungen zu mitteln. Die Software bietet vielfältige Analysemöglichkeiten wie Endpunktbestimmung, Bestimmung von Kinetiken und Messung von Fluoreszenzlebensdauern. Außerdem werden komfortable Methoden zur statistischen Datenauswertung zur Verfügung gestellt. Die gesammelten Daten können für eine weitere Auswertung oder für eine Archivierung exportiert werden. Die Analyse der Fluoreszenzlebensdauern im FLT-Messmodus erfolgt vollautomatisch durch eine speziell entwickelte Treiberfunktion.